Dibenzyl-N,N'-diisopropylphosphoramidit

Ein zuverlässiges Phosphorylierungsreagenz – Dibenzyl-N,N'-Diisopropylphosphoramidit

Die Proteinphosphorylierung spielt bei biochemischen Prozessen eine sehr wichtige Rolle. Enzyme, die Phosphatgruppen einführen, heißen Kinasen, und Enzyme, die Phosphatgruppen entfernen, heißen Phosphatasen. Proteinphosphorylierung kann bei vielen Arten von Aminosäuren (der Haupteinheit von Proteinen) auftreten, von denen Serin, Threonin und Tyrosin die wichtigsten sind. Darüber hinaus sind funktionelle Gruppen, die Phosphorsäure enthalten, sehr häufige funktionelle Gruppen in einigen niedermolekularen Arzneimitteln, insbesondere in Nukleotidmedikamenten, wie dem 2013 auf den Markt gebrachten Starmedikament gegen Hepatitis C, Sofosbuvir, und den früheren Nukleotidmedikamenten Tenofo Wei und Adefovir. Darüber hinaus wurden mit dem Aufkommen genetischer Medikamente einige Oligonukleotidmedikamente von der FDA zugelassen, darunter: Antisense-Oligonukleotidmedikamente (ASOs), Nukleinsäure-Aptamermedikamente (Apatmere), niedermolekulare Interferenz-RNA-Medikamente (siRNAs) usw. Vor einiger Zeit wurde Nosinagen-Natrium, ein Medikament gegen seltene Krankheiten, das 700.000 Yuan pro Injektion kostet, direkt auf weniger als 33.000 Yuan pro Injektion reduziert, nachdem der nationale Krankenversicherungsunterhändler ein „Seelengeschäft" abgeschlossen hatte. Sobald die Nachricht ausgestrahlt wurde, war das Internet überschwemmt. Alle jubelten den Verhandlungsführern der staatlichen Krankenversicherung zu und waren auch erleichtert für die Familien der Patienten. Was jedoch kaum bekannt ist, ist, dass dieses derzeit weltweit einzige Medikament zur Behandlung der spinalen Muskelatrophie (SMA) auch ein Antisense-Oligonukleotid-Medikament (ASO) ist (Abbildung 1). Es ist ersichtlich, dass die Phosphat-Funktionsgruppe einigen Medikamenten sehr wichtige und entscheidende pharmakologische Aktivitäten verleiht.

Abbildung 1 Sofosbuvir (links) und Nosinagen-Natrium (rechts)

Es gibt viele Möglichkeiten, funktionelle Phosphorsäuregruppen in die Arzneimittelsynthese einzuführen. Zu den üblichen Phosphorylierungsreagenzien gehören: Phosphoroxychlorid, Pyrophosphorylchlorid, Dimethylchlorphosphat, Diphenylchlorphosphat usw. (Abbildung 2). Jedes dieser Phosphorylierungsreagenzien hat Vor- und Nachteile. Nachdem Phosphoroxychlorid und Pyrophosphorylchlorid unter alkalischen Bedingungen mit Alkohol reagiert haben, können sie hydrolysiert werden, um Phosphorsäuregruppen zu erhalten. Die Vorteile dieser beiden Reagenzien sind der niedrige Preis und die einfache Handhabung, aber der Nachteil ist, dass das Produkt oft eine kleine Menge ähnlicher polarer Verunreinigungen enthält, was die Reinigung des Produkts erschwert. Alkohol kann auch mit Dimethylchlorphosphat oder Diphenylester umgesetzt werden, um ein Phosphatzwischenprodukt zu erzeugen und dann die Schutzgruppe zu entfernen, um eine funktionelle Phosphorsäuregruppe zu erhalten. Die durch diese beiden Phosphorylierungsreagenzien erzeugten Phosphatzwischenprodukte können isoliert und gereinigt werden. Dimethylphosphat-Zwischenprodukte erfordern im Allgemeinen die Verwendung von Trimethylbromsilan, um Methylester zu entfernen, was für einige säureempfindliche Substrate nicht geeignet ist; und Diphenylphosphat-Zwischenprodukte erfordern stöchiometrische Mengen Platindioxid als Katalysator, um Phenylgruppen zu entfernen – katalytische Mengen von Platindioxid oder Palladium auf Kohlenstoff können Phenylgruppen nicht entfernen, sodass diese Synthesemethode aus Sicht der Produktionskosten zu teuer ist.

Abbildung 2 Gängige Phosphorylierungsreagenzien

Dieser Artikel stellt ein zuverlässiges Phosphorylierungsreagenz vor – Dibenzyl-N,N'-Diisopropylphosphoramidit, eine farblose oder hellgelbe ölige Substanz. Dibenzyl-N,N'-Diisopropylphosphoramidit ist sehr säureempfindlich. Aufgrund des hohen Siedepunkts dieser Verbindung (130 °C/0,55 mmHg) ist es ziemlich schwierig, sie durch Vakuumdestillation zu reinigen, daher ist die Reinheit von auf dem Markt verkauftem Dibenzyl-N,N'-Diisopropylphosphoramidit normalerweise nicht hoch. Mehr als 98 %.

Abbildung 3 Dibenzyl-N,N'-diisopropylphosphoramidit und seine Anwendung

Die übliche Methode zur Einführung von Phosphorsäuregruppen mit Dibenzyl-N,N'-diisopropylphosphoramidit ist in drei Schritte unterteilt: (1) Dibenzyl-N,N'-diisopropylphosphoramidit und Alkohol in vier Unter der Katalyse von Stickstoffazol oder 4,5-Dicyanimidazol und anderen schwachen Säuren werden dreiwertige Phosphorsäure-Zwischenprodukte erzeugt; (2) Phosphorsäure-Zwischenprodukte werden zu fünfwertigen Dibenzylphosphat-Zwischenprodukten oxidiert, die abgetrennt und gereinigt werden können (3) Zwei Benzylgruppen werden durch katalytische Palladium-Kohlenstoff-Hydrierung entfernt, um eine Phosphorsäure-Funktionsgruppe zu erhalten. Im Vergleich zu den oben genannten Phosphorylierungsreagenzien hat Dibenzyl-N,N'-diisopropylphosphoramidit die Vorteile milder Reaktionsbedingungen, einfacher Handhabung, leichter Reinigung der Zwischenprodukte und niedriger Produktionskosten.

Nach vielen technologischen Innovationen ist unser Unternehmen nun in der Lage, Dibenzyl-N,N'-diisopropylphosphoramidit mit einer Gasphasenreinheit und NMR-Reinheit von über 98 % im Kilogrammmaßstab herzustellen! Gleichzeitig produziert und verkauft das Unternehmen auch hochwertiges Tetrazol, 4,5-Dicyanimidazol und andere verwandte Produkte. Freunde in Not können uns gerne für Anfragen anrufen!